一、標(biāo)準(zhǔn)變化

與2013年版標(biāo)準(zhǔn)相比，GB 5009.300-2025主要進(jìn)行了以下重大修訂：

（一）標(biāo)準(zhǔn)名稱與適用范圍擴(kuò)大：標(biāo)準(zhǔn)名稱由《嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定》更改為《食品中左旋肉堿的測(cè)定》，擴(kuò)大了標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍；

（二）檢測(cè)方法的擴(kuò)充與優(yōu)化：在原有的第一法（分光光度法）基礎(chǔ)上，新增了兩種檢測(cè)方法：第二法（柱前衍生-高效液相色譜法）和第三法（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法），并對(duì)原有方法進(jìn)行了多項(xiàng)優(yōu)化。

二、三種測(cè)定方法

（一）第一法：分光光度法

1.基本原理：試樣經(jīng)過(guò)水提取、高氯酸沉淀蛋白質(zhì)后，結(jié)合態(tài)的左旋肉堿經(jīng)堿皂化游離出來(lái)。隨后，在乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶的催化下，左旋肉堿與乙酰輔酶A反應(yīng)生成乙酰肉堿和游離的輔酶A。游離的輔酶A與特定試劑反應(yīng)生成黃色物質(zhì)，在412 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度。顏色的深淺與左旋肉堿的含量成正比，據(jù)此進(jìn)行定量分析。

2.主要優(yōu)化點(diǎn)

（1）增加了液態(tài)試樣的前處理方法，解決了液態(tài)嬰幼兒配方食品的檢測(cè)難題。

（2）優(yōu)化了試樣處理步驟，例如增加了低濃度（3%）高氯酸溶液用于調(diào)節(jié)pH，縮短了冷藏時(shí)間，從而提高了檢測(cè)效率。

（3）規(guī)范了方法的線性范圍，使標(biāo)準(zhǔn)曲線低點(diǎn)與方法的定量限更為匹配。

3.適用范圍：適用于嬰幼兒食品（不含部分特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品）和乳品。

（二）第二法：柱前衍生-高效液相色譜法

1.基本原理：試樣中的左旋肉堿經(jīng)稀鹽酸提取、堿皂化、乙腈沉淀蛋白后，使用陽(yáng)離子交換固相萃取柱進(jìn)行凈化。凈化的左旋肉堿在催化劑存在下，與L-丙酰胺-β-萘胺發(fā)生衍生化反應(yīng)，生成衍生物。最后通過(guò)高效液相色譜儀進(jìn)行分離和測(cè)定，外標(biāo)法定量。

2.方法優(yōu)勢(shì)：使用特定的衍生反應(yīng)，顯著提高了檢測(cè)的專屬性和靈敏度，同時(shí)適合批量樣本的檢測(cè)。

3.適用范圍：適用于食品（不含特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品和特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品）。

（三）第三法：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1.基本原理：試樣用水溶解或稀釋，經(jīng)微波輔助提取后，通過(guò)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行分析測(cè)定。該方法通常采用穩(wěn)定性同位素（如左旋肉堿-d3）作為內(nèi)標(biāo)，內(nèi)標(biāo)法定量，從而保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度。

2.方法優(yōu)勢(shì)：具有高的靈敏度與準(zhǔn)確性，降低了檢測(cè)成本，適用于對(duì)檢測(cè)要求最為嚴(yán)格的品類和高通量監(jiān)控場(chǎng)景。

3.適用范圍：適用于嬰幼兒配方食品和特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品。

三、總結(jié)

GB 5009.300-2025通過(guò)方法多樣化、適用范圍擴(kuò)大以及技術(shù)細(xì)節(jié)的優(yōu)化，該標(biāo)準(zhǔn)能夠滿足不同場(chǎng)景下對(duì)左旋肉堿準(zhǔn)確測(cè)定的需求，為食品安全監(jiān)管和企業(yè)質(zhì)量控制提供了有力的技術(shù)支撐。璽標(biāo)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)生產(chǎn)商，助力GB 5009.300-2025，歡迎各大客戶前來(lái)選購(gòu)！